Histología

En ratas Wistar

Cortesía del Laboratorio del Departamento de Patología de la Facultad de Medicina de Ribeirão Preto - USP

histology

01

Grupo de
Estudio

Experimentadores: R.Mené, M.Kim, A.Tenenbaum

N = 29 ratas Wistar
Peso medio: 421g

Origen de los animales: Biotério Central del Campus de Ribeirão Preto de la Universidad de São Paulo
Mantenimiento: Laboratorio de Patología Experimental del Departamento de Patología de la Facultad de Medicina de Ribeirão Preto - USP
Mantenimiento de animales: cajas de polipropileno
Comida para animales: dieta básica de laboratorio y agua.
Condiciones de luz: ciclos naturales de luz / oscuridad en condiciones básicas controladas
Experimentadores: A.Tenenbaum, R.Mené, Kim

pathology department

02

Sacrificio de animales y muestras histológicas

Microscopía convencional

Los ratones fueron sacrificados en cámaras de CO2.

  • Incisión de la piel con bisturí nº 23
  • Hallazgo y aislamiento del músculo pretibial con tijeras de Metzenbaum
  • Sección de tendones con tijeras Mayo.
  • Fijación de porciones de los músculos en secciones de alcornoque
  • Incrustación con solución de formaldehído al 50% - tamponada al 10% y parafina pura al 50% para estudio microscópico óptico convencional.
  • Secciones de tinción como proceso histológico de rutina.
  • Microtomo utilizado: Leika RM 2155
  • Coloración de cortes de músculo con

-hematoxilina-eosina
-Tricrómico de Masson
-y picro-sirius rojo.

  • El examen histológico se realizó con un microscopio convencional. (Olympus BH-2).
  • Observación bajo lámpara polarizada
  • La documentación fotográfica se realizó con un microscopio Leica DMR unido a una cámara digital Leica CD 300F y un PC compatible.
microtome

03

Material

6 ratas / caja
  • Los animales se dividieron en 6 cajas, de modo que las cajas del 1 al 5 tenían 5 ratas y la caja 6 tenía 4 ratas.
  • Todos los animales fueron sometidos a una evaluación de la marcha mediante la impresión de la huella en un papel especial y la inmersión previa de las patas traseras en una solución jabonosa.. 
  • La caja 1 tenia el grupo de control, que recibió la aplicación de 0,1 ml de solución salina (NaCl 0,9%) en el músculo pretibial derecho
  • Los ratones de las cajas 2 a 5 recibieron 0,1 ml de producto principal original de Endopeels en el mismo músculo que el grupo de control.
  • La caja 6 estaba constituida por 4 ratas, y cada una recibió 0,5 ml del producto principal original de Endopeels inyectado en la capa subcutánea. 

  • Todos los animales se sometieron a evaluación de la marcha antes y después de sus respectivas inyecciones.

 

boxes for rats

04

Métodos

Los animales se sacrifican después de 10 días-1 mes- 3 meses-7 meses
sacrifice table

05

Control

Después de la inyección de NaCl al 0,5%

Comentario: Nada que declarar después de la inyección de solución salina.

without treatment

L: Pretibial-Sin tratamiento

R: Pretibial-Después de 0,1 ml de NaCl 0,9% IM

06

10 días después de la inyección de Endopeel

Caja 2

10 días después de la inyección de Endopeel 0,1 ml en el músculo pretibial derecho.

Aquí puede ver la formación de las vacuolas que están rodeadas de linfocitos. Las vacuolas son diferentes a la necrosis tisular. La presencia de linfocitos está relacionada con la permeabilidad de las membranas celulares.

left control- 100xD10

L : Control-100xD10

right 100xD10

R:100xD10

right200xx

R :200xD10

right400xxD10

R :400xD10

07

1 mes después de la inyección de Endopeel

Caja 3

1 mes después de la inyección de Endopeel 0,1 ml en el músculo pretibial derecho.
¡Lo que se ve en negro en las imágenes no es una necrosis como podrían imaginar algunos científicos!
De hecho, hay que tener en cuenta 4 conclusiones

  • un artefacto de coloración
  • una ausencia de necrosis
  • una apoptosis
  • un proceso biorregenerativo
left control- 100xD30

L : Control-100xD30

right 100x

R:100xD30

right400xxD30

R :400xD30

08

3 meses después de la inyección de Endopeel

Caja 4

3 meses (D90) después de la inyección de Endopeel 0.1ml en el músculo pretibial derecho.

left control- 100xD90

L : Control-100xD90

right 100x

R:100xD90

09

7 meses después de la inyección de Endopeel

Caja 5

7 meses (D210) después de la inyección IM de Endopeel 0,1 ml en el músculo pretibial derecho.


Restitutio ad integrum (restauración a la condición original) completa después de 7 meses

left control- 100xD210

L : Control-100xD210

right 100x

R:100xD210

L Control 50xD210

L :Control 50xD210

R50X-D210

R50X-D210


10 Inyección subcutánea

Inyección de endopeel en tejido subcutáneo

Caja 6

0,5 ml (5 x 0,1 ml) Endopeel SC Inyección en el área pretibial subcutánea derecha.

L:200x-Control-SC

R-D10-SC-200X

R-D10-SC-200X

R-D30-SC-200X

R-D30-SC-200X

R-D90-SC-200X

R-D90-SC-200X

R-D210-SC-200X

R-D210-SC-200X

R-D210-SC-400X

R-D210-SC-400X


conclusions
    • Endopeel induce una miofibrólisis selectiva reversible y una reacción inflamatoria en un período de 1 mes, aproximadamente
    • Los cambios musculares son reversibles casi en su totalidad.
    • El músculo es el mejor lugar para inyectar Endopeel debido a su mayor eficacia, control y duración de su acción.
    • No se han encontrado necrosis ni abscesos en todo el estudio.

Otro estudio aplicado a Ginecología

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